Avis de soutenance - doctorat - Adrien THIESSON

Le virus Toscana (TOSV) est un arbovirus transmis par les phlébotomes et circule dans les pays méditerranéens, où il est une des principales causes d'encéphalites et de méningites durant l'été. Parmi les souches isolées, deux lignées génétiquement distinctes ont été identifiées (nommées A et B). Cependant, les relations entre la diversité génétique interlignée et la pathogénicité virale ou la compétence vectorielle restent inconnues. Dans ce contexte, une étude comparative de deux souches de TOSV issues des lignées A et B initiée au sein de notre équipe en amont de ce projet de thèse avait permis de démontrer une différence de pathogénicité entre ces deux souches dans un modèle murin 129/Sv IFNAR-/-. Nous avons donc cherché à identifier les déterminants génétiques impactant le cycle viral, la pathogénicité et la transmission du virus Toscana. En utilisant un système de génétique inverse nouvellement développé (Alexander et al., 2020), nous avons généré deux virus, rTOSV-A et rTOSV-B, représentatifs des souches sauvages caractérisées in vivo. Nous avons démontré en modèle in vitro mammifère que rTOSV-B présente une internalisation plus lente dans les cellules et induit une production de particules infectieuses plus faible par rapport à rTOSV-A. En créant des virus réassortants et chimériques, nous avons ensuite pu mettre en évidence que le segment M du TOSV, et plus particulièrement la séquence codante de la glycoprotéine Gn, était responsable de ces différences. En modèle in vitro insecte, nous avons également démontré que la capacité réplicative du TOSV était médiée par la diversité génétique au sein du segment L. Nous avons enfin montré in vivo que rTOSV-B infectait et disséminait plus efficacement dans l'espèce de phlébotome Phlebotomus tobbi. En conclusion, le développement de différents modèles expérimentaux et outils moléculaires combiné à une approche comparative de deux souches de TOSV nous a permis de montrer que la variabilité génétique du TOSV peut fortement impacter les propriétés biologiques de ce virus. En l'absence de vaccin disponible contre TOSV, il est donc important de poursuivre nos efforts pour caractériser génétiquement les souches circulantes de TOSV afin d'identifier les déterminants viraux impliqués dans sa virulence et sa transmission. A terme, ces travaux permettront d'évaluer plus efficacement les risques épidémiologiques d'une souche donnée.