Avis de soutenance - doctorat - Dimitri MEDETIAN
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Ecole doctorale 472
CNRS 1919 route de Mende 34000 Montpellier
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Soutenue par
Dimitri MEDETIAN
Développement d'un capteur passif à ADN environnemental pour la détection de la biodiversité aquatique
Depuis quinze ans, les études de la biodiversité grâce à l'ADN environnemental (ADNe) se sont rapidement multipliées dans des environnements variés (eau, sol, air). L'ADNe correspond à l'ADN naturellement relâché dans le milieu par les organismes. Une fois cet ADN récupéré sur le terrain, celui-ci est extrait, amplifié puis associé aux espèces ciblées. En milieu aquatique, la méthode de prélèvement la plus couramment utilisée est la filtration d'un volume d'eau (de quelques millilitres à plusieurs dizaines de litres). Bien que très efficace pour décrire les communautés d'espèces en place dans un milieu, cette méthode présente certaines limites comme le temps et l'expertise nécessaires à son déploiement, la possibilité de ne pas détecter le signal du passage d'une espèce rare ou mobile ou encore son coût.
En réponse à cela, depuis 2020, plusieurs équipes de recherche se sont intéressées au développement de capteurs passifs à ADNe. Au début de cette thèse, seulement cinq publications sur cette thématique existaient, principalement basées sur des tests de différents matériaux. Cette thèse vise donc à participer au développement de capteurs passifs à ADNe en tant que nouvelle méthode d'échantillonnage en reprenant l'ensemble des étapes de création et d'expérimentations d'un capteur passif à ADNe.
Cette conception s'est déroulée à travers différentes échelles allant des tests en laboratoire, aux expériences en milieux contrôlés jusqu'aux études en milieu naturel. Au niveau biologique, cette thèse s'est concentrée sur la détection des poissons à nageoires rayonnées. De plus, une approche interdisciplinaire a été adoptée entre biologie moléculaire, sciences des matériaux, écologie et courantologie.
Cette thèse s'est ainsi déroulée en quatre temps comprenant : (1) la conception en laboratoire d'un modèle de capteur passif, (2) des tests en bassins contrôlés contenant une espèce unique de poisson, (3) la simulation du passage d'un organisme dans un réseau de capteurs disposé en milieu naturel et (4) une étude de terrain d'un poisson migrateur, l'alose feinte de Méditerranée.
Les expériences de laboratoire ont permis de concevoir un modèle unique de capteur passif composé d'une petite membrane de polyacrylonitrile (dérivé de plastique de 2.6 cm2) encapsulée dans un boîtier de deux pièces plastiques réutilisables réalisées en impression 3D. Ce modèle facilite les étapes de biologie moléculaire et est très résistant pour un déploiement sur le terrain. Les tests en bassins contrôlés montrent que l'augmentation de la densité de poissons est le facteur principal permettant une meilleure détection. En revanche, aucune conclusion sur l'effet de la durée d'exposition du capteur n'a pu être formulée. Par ailleurs, les résultats contrastés de simulation du passage d'un organisme dans un réseau de capteurs démontrent la marge de progression dans la compréhension des interactions entres capteurs passifs, ADN environnemental et écosystèmes. Enfin, les inventaires multi-espèces en milieu naturel et la détection d'un poisson migrateur prouvent le potentiel des capteurs passifs pour intégrer spatialement et temporellement le signal d'ADNe même si ces apports doivent encore être étudiés et optimisés.
Development of a passive environmental DNA sampler for aquatic biodiversity detection
Over the past fifteen years, biodiversity studies using environmental DNA (eDNA) have rapidly expanded in various environments (water, soil, air). eDNA corresponds to DNA naturally released by organisms into their environment. Once collected, the DNA is amplified and then associated to target species. In aquatic environments, the most common sampling method relies on filtering a specific volume of water (from few millilitres to dozens of litres). While this method is highly effective in describing local species communities, limitations appear such as the time and expertise required, the risk of failing to detect rare or mobile species and its cost.
In response, since 2020, several research teams have begun to develop passive environmental DNA samplers. At the start of this thesis, only five publications were available, mainly focused on testing different materials. Therefore, this thesis aims to contribute to the development of passive samplers as a new sampling method by covering all stages of the creation and testing of a passive eDNA sampler. This development was done through several scales from laboratory tests to experiments in controlled environments until studies in natural environments. At the biological level, this thesis was focused on the detection of ray-finned fish. An interdisciplinary approach combining molecular biology, material sciences, ecology and hydrodynamics was adopted.
This thesis was thus structured into four parts: (1) the passive sampler design in laboratory, (2) tests in controlled tanks containing a single fish species, (3) the simulation of the passage of an organism through a network of passive samplers deployed in a natural environment and (4) a field study targeting a migratory fish species, the twaite shad.
Laboratory experiments led to design a unique passive sampler model composed of a small polyacrylonitrile membrane (plastic derivative of 2.6 cm2) encapsulated in two reusable 3D-printed plastic pieces. This design facilitates molecular biology steps and is highly resistant in the field. Tests in controlled tanks showed that increasing fish density was the main factor improving detection. Conversely, no conclusions were reached concerning passive sampler's exposure time. Moreover, the contrasting results of the simulation of an organism's passage highlight the need for further research to better understand the interactions among passive samplers, eDNA and ecosystems. Finally, multi-species inventories in natural environments as well as the detection of a migratory fish species demonstrate the potential of passive samplers to spatially and temporally integrate eDNA signal, although these contributions still need to be further explored and optimized.
Directeur de thèse :
Claude MIAUD
Unité de recherche :
CEFE - Centre d'Ecologie Fonctionnelle et Evolutive
Membres du jury :
- Directeur de thèse : Claude MIAUD , Directeur d'études (EPHE)
- Rapporteur : Isabelle DOMAIZON , Directeur de recherche (INRAE)
- Rapporteur : Jean-Luc JUNG , Professeur (Museum national d'Histoire naturelle)
- Examinateur : Sylvain PIOCH , Maître de conférences (Université de Montpellier Paul Valéry)
- Examinateur : Valeriano PARRAVICINI
Diplôme :
Doctorat Systèmes intégrés, environnement et biodiversité
Spécialité de soutenance :
Biodiversité et écosystèmes fossiles et actuels